Мазок или бакпосев на коклюш

Bordetella pertussis, ДНК [ПЦР]

Общая информация об исследовании

Bordetella pertussis (B. pertussis) – это грамотрицательная аэробная коккобацилла, являющаяся возбудителем коклюша. Инфекция передается воздушно-капельным путем. Риск заболеть наиболее высок у не вакцинированных АКДС детей и беременных женщин. Следует отметить, что прививка АКДС не обеспечивает стопроцентную защиту от заражения, так как иммунный ответ постепенно угасает в течение 1-3 лет после вакцинации. В этой связи подростки и взрослые, вакцинированные более чем 3 года назад и находившиеся в тесном контакте с больным коклюшом или носителем B. pertussis, также подвергаются риску заражения.

В клинической практике применяют несколько лабораторных тестов для диагностики коклюша: посев на питательную среду, метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ), серологические методы и исследование с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). ПЦР – метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в носоглоточном аспирате) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции и наиболее точно и быстро диагностировать коклюш.

Специфичность ПЦР достигает 100 %, что обусловлено использованием в реакции специфичной именно для B. pertussis пары праймеров. Положительный результат у пациента с признаками поражения респираторного тракта позволяет подтвердить диагноз «коклюш» и исключить наличие других бактериальных (в том числе паракоклюша) и вирусных заболеваний.

Исследование с помощью ПЦР характеризуется высокой чувствительностью, превосходящей чувствительность бактериологического метода, ПИФ и реакции непрямой гемагглютинации (РНГА). Следует, однако, заметить, что она зависит от клинической стадии заболевания, в которую был взят биоматериал, от возраста пациента и предшествующего лечения.

В течении коклюша можно выделить 4 стадии: инкубационный период, катаральную, пароксизмальную стадию и стадию выздоровления. ПЦР является предпочтительным методом идентификации возбудителя при подозрении на коклюш в катаральную и раннюю пароксизмальную стадию (около 4 недель после появления первых симптомов). В этот период чувствительность ПЦР максимальна и превосходит чувствительность бактериологического метода. По прошествии более 3-4 недель чувствительность ПЦР несколько снижается. Это имеет особое значение при диагностике заболевания у взрослых пациентов, которые, как правило, игнорируют первые симптомы болезни, характерные для катаральной стадии, и обращаются за помощью в более поздние сроки, в пароксизмальную стадию. При диагностике коклюша в позднюю пароксизмальную стадию и при выздоровлении наиболее точные результаты будут получены при комбинации серологических исследований (например, РНГА) и исследования с помощью ПЦР.

Также ПЦР оптимальна для диагностики коклюша у младенцев, хотя у детей старшего возраста, а также подростков и взрослых она характеризуется большим числом ложноотрицательных результатов. Так, ее чувствительность при взятии биоматериала в первые 10 дней болезни в возрастных группах до 1 года, 1-4 года и старше 5 лет составила 70, 50 и 10 % (для сравнения: чувствительность «золотого стандарта» диагностики коклюша — посева на питательную среду — в этот период не превышает 60 %). В качестве биоматериала для диагностики коклюша у младенцев предпочтителен носоглоточный аспират. У детей старшего возраста, подростков и взрослых берут мазки из носоглотки и зева. Использование тампона из кальция альгината в этом случае не рекомендуется.

В отличие от других лабораторных методов, точность ПЦР в меньшей степени зависит от приема антибактериальных препаратов. Так, чувствительность метода при взятии биоматериала на 4-й день лечения эритромицином составила 89 % (бактериологического посева – 56 %), на 7-й день – 56 % (посева – 0). Поэтому ПЦР чаще выбирают для выявления B. pertussis у пациентов в катаральной стадии заболевания, если биоматериал сдается на фоне начатого лечения. Результаты теста при сдаче биоматериала на фоне лечения в пароксизмальную стадию во многих случаях ложноотрицательные.

Исследование с помощью ПЦР с успехом применяется у вакцинированных АКДС пациентов. При этом идентификация B. pertussis в мазках этой группы может означать транзиторное носительство, но не активную инфекцию, поэтому результаты ПЦР рекомендуется оценивать с помощью дополнительных эпидемиологических, клинических и лабораторных данных.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики коклюша, особенно у младенцев в период катаральной и ранней пароксизмальной стадии заболевания.

Когда назначается исследование?

• При симптомах коклюша в катаральной стадии: лихорадка, насморк, заложенность носа, слезотечение.
• При симптомах коклюша в пароксизмальной стадии: приступы интенсивного кашля, сопровождающиеся глубоким свистящим вдохом, рвотой, цианозом кожи лица.
• При обследовании пациента, находившегося в тесном контакте с больным коклюшем.

Такой метод исследования, как бактериологический посев, довольно часто назначают врачи различных специальностей. Зачем делают бакпосев? О чём могут рассказать его результаты? На эти и другие вопросы ответил врач-инфекционист, главный врач «Клиники Эксперт» Воронеж Владислав Александрович Чередниченко.

— Владислав Александрович, расскажите, бакпосев – что это за анализ? Когда его назначают и для чего он нужен?

— Бактериологический посев представляет собой исследование биологического материала, помещённого в особую питательную среду, подходящую для роста бактерий. Данный анализ назначается при подозрении на бактериальную инфекцию и в целях профилактики. Он помогает очень точно выявить типы бактерий (возбудителей многих инфекций), и, кроме того, определить их чувствительность к антибиотикам. Это немаловажно с точки зрения назначения правильного и действенного лечения.

Анализ на бакпосев применяется в гинекологии, урологии, онкологии, хирургии. Его также используют дерматологи, гастроэнтерологи, оториноларингологи и другие специалисты.

— Какой материал может использоваться для бакпосева?

— Это может быть любая биологическая жидкость и выделения, патологическое отделяемое и т. п., а также ткань практически с любого участка человеческого организма. Например:

• слизистая из горла и носа;
• слизистая глаз;
• мазок из уретры;
• мазок из цервикального канала;
• содержимое уха;
• суставная жидкость;
• плевральная жидкость;
• секрет простаты;
• желчь;
• кал;
• моча;
• гной;
• кровь;
• грудное молоко;
• содержимое кист, воспалительных очагов, отделяемое раны и др.

— Что показывает анализ на бакпосев?

— Как я уже говорил, бакпосев – максимально точный способ распознавания инфекций, вызываемых болезнетворными бактериями и грибками. Его цель – установить, какие микроорганизмы находятся в исследуемом материале. При проведении анализа можно обнаружить, например, кишечную палочку, трихомонады, хламидии, стафилококк, стрептококк, пневмококк, сальмонеллы, различные грибки и проч.

— Как правильно сдавать анализ на бакпосев? Нужна ли какая-то особая подготовка? И если да, какие есть особенности, отличия в подготовке в зависимости от того, какой материал сдаётся для исследования?

— Для получения достоверного результата по согласованию с лечащим врачом за 7 дней до взятия материала прекращают приём антибиотиков или антибактериальных препаратов. Если проводится местное лечение, также прекращают медикаментозную обработку очага поражения.

Перед сдачей некоторых анализов необходимо соблюдать определённые инструкции. Если ими пренебрегать, это может привести к получению сомнительных данных, и анализ придётся проводить повторно. В зависимости от того, какой биологический материал берётся для анализа, лечащий врач, назначая исследование, расскажет пациенту, как к нему подготовиться.

Возьмём, к примеру, анализ на бакпосев мочи. Как его правильно сдавать? Забор мочи нужно производить в специально предназначенную для этого стерильную одноразовую ёмкость, которую можно приобрести в любой аптеке. Нельзя сдавать мочу в нестерильные, бывшие ранее в употреблении ёмкости. Наиболее достоверно исследование средней утренней порции мочи – после ночного сна и до завтрака.

Мазок на бакпосев из цервикального канала также нужно сдавать, соблюдая конкретные правила. За несколько дней до назначенной процедуры нельзя применять вагинальные свечи, контрацептивные средства, спринцевания. Необходимо также воздержаться от сексуальных контактов за сутки до исследования. Анализ нужно сдавать приблизительно через 7 дней после прекращения менструации.

— Сколько дней нужно для получения результатов анализа?

— От 5 до 13 рабочих дней, в зависимости от того, на какой микроорганизм был взят материал для исследования.

— Как прочитать полученный результат бакпосева?

— По итогам исследования лаборатория выдаёт заключение. В нём указывается, какие микроорганизмы были обнаружены, их численность, а также чувствительность каждого из них к медикаментам. В любом случае, точно прочитать полученный результат и сделать по нему назначение может только специалист.

— Помимо бакпосева есть и другие методы, которые позволяют обнаруживать микроорганизмы – например ПЦР. Не могут ли они полностью заменить бакпосев?

— Нет, так как только бакпосев может определить чувствительность микроорганизмов к антибиотикам. И вообще говоря, эти методики очень отличаются друг от друга. Поэтому вопрос, который иногда задают: что лучше ПЦР или бакпосев – в принципе, не совсем правильный. Бакпосев – «золотой стандарт» диагностики многих инфекций ввиду его высокой чувствительности и информативности, а также основной метод контроля эффективности лечения. Его единственный недостаток – длительность выполнения. У ПЦР, других методов исследования микроорганизмов – свои задачи.

Хотите узнать больше о лабораторных анализах? Читайте статьи в нашей рубрике

Беседовала Марина Воловик

Редакция рекомендует:

Почему антибиотики не помогают?
Вирусы и бактерии – в чём принципиальное отличие?
Микроб, открой «личико»!

Для справки

Чередниченко Владислав Александрович    

В 2000 г. окончил Донецкий медицинский университет по специальности «Лечебное дело».

С 2000 по 2002 г. проходил ординатуру по специальности «Врач-инфекционист» в Украинской военно-медицинской академии.  

В 2019 г. окончил ординатуру по специальности «Врач-рентгенолог».

В настоящее время – главный врач «Клиники Эксперт» Воронеж.