Как брать мазок из зева на коклюш

Содержание статьи

Анализы на коклюш и паракоклюш: когда они назначаются и как проводится лабораторная диагностика инфекции

Многие считают, что коклюш — детская инфекция, редко встречающаяся и легко протекающая. В действительности и коклюш, и паракоклюш становятся все более серьезной проблемой в мире из-за тяжелого течения и наличия атипичных, или стертых, форм. В этой статье мы расскажем, как вовремя распознать это непростое заболевание.

Чем опасен коклюш и почему так важна его оперативная диагностика

Коклюш — острое инфекционное заболевание, поражающее преимущественно детский организм и сопровождающееся спазматическим кашлем. Инфекция передается воздушно-капельным путем: при кашле, чихании и даже во время разговора.

Коклюш вызывает бактерия Bordetella pertussis, которая попадает в дыхательные пути и прикрепляется к клеткам эпителия. В результате микроскопические реснички, помогающие выводить мокроту и очищать бронхи, повреждаются. Бактерия начинает размножаться и выделять несколько видов токсинов, которые и приводят к появлению симптомов.

Справка

Впервые бактерия-возбудитель коклюша описана в 1906 году французским ученым О. Жангу и бельгийским иммунологом и бактериологом Ж. Борде, по имени которого и названа.

Первый симптом коклюша — ночной кашель. Постепенно он усиливается и появляется днем. Так может продолжаться до двух недель. Со временем состояние ухудшается, кашель становится спастическим, или спазматическим. Во время приступа человек с трудом может вдохнуть, напрягается, лицо становится красным или даже синеватым, появляется ощущение нехватки воздуха. Приступ такого мучительного кашля иногда заканчивается рвотой или выделением очень густой стекловидной мокроты.

Проблема своевременной диагностики заключается в том, что патология начинается с незначительных симптомов. Сухое покашливание ночью или перед сном напоминает кашель при ОРВИ. Температура тела больного может как незначительно повыситься на несколько дней, так и остаться нормальной. Общее самочувствие инфицированного почти не страдает. И только когда появляются более серьезные симптомы, врачи начинают задумываться о полноценной лабораторной диагностике коклюша.

Еще в начале прошлого столетия коклюш считался одной из самых опасных инфекций, он ежегодно становился причиной смерти тысяч детей. Но даже на современном уровне развития медицины коклюш может протекать очень тяжело.

Кстати

Контактный (например, через игрушки) путь передачи коклюша невозможен, поскольку бактерия Bordetella pertussis быстро погибает во внешней среде.

Исследования, проведенные в 2000-е годы, указывают на значительное увеличение за последнее десятилетие доли тяжелых и среднетяжелых случаев коклюша. Если в 1990-х годах регистрировалось только 18,6% тяжелых форм болезни, то в 2000-е — уже 43,2%.

Токсины, которые выделяет возбудитель коклюша, поражают дыхательный центр в головном мозге. Из-за этого возникает нарушение дыхания, в крови становится меньше кислорода, увеличивается содержание углекислого газа. Возникает гипоксия — кислородное голодание. Поражаются сосуды, развивается повреждение головного мозга (энцефалопатия). В крови увеличивается количество лимфоцитов и лейкоцитов.

К осложнениям коклюшной инфекции относят ателектаз легкого (сближение и сжатие стенок легкого, сопровождающееся выходом воздуха с данного участка), кровоизлияния на коже и в конъюнктиву глаза, поражение сосудов, энцефалопатию, легочное сердце. Из-за снижения иммунитета часто присоединяется вторичная инфекция, развивается бронхит или пневмония.

Паракоклюш — острое инфекционное заболевание, вызываемое бактерией Bordetella parapertussis. Она очень похожа по своему строению на возбудитель коклюша и поэтому вызывает практически такие же симптомы.

Раньше считалось, что паракоклюш — более легкое заболевание. Но последние исследования доказали, что он тоже может привести к тяжелому судорожному кашлю, рвоте и нарушению дыхания. Единственное клиническое отличие этого заболевания от коклюша — отсутствие повышения уровня лейкоцитов в крови.

Особо тяжелые последствия наблюдаются при заражении взрослых и подростков. По данным серологических исследований, проведенных в США, 12-21% взрослых с кашлем более 2 недель могут болеть коклюшем. В России ситуация примерно такая же. Согласно исследованиям ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, проведенным в очагах коклюша, после контакта с зараженным заболело 23,7% взрослых.

У подростков и взрослых коклюш часто протекает в атипичной или вовсе бессимптомной форме. При этом родители, старший брат или сестра с «обычным ОРВИ» являются серьезной угрозой для младших детей в семье. Поэтому так важно вовремя выявить инфекцию не только у малышей, но и у взрослых.

Какие анализы нужно сдавать при подозрении на коклюш

Существуют бактериологические, серологические и ПЦР-методы диагностики коклюша и паракоклюша. Биологический метод (посев материала из носоглотки и культивирование его на питательной среде) информативен на раннем этапе. В первые дни болезни он дает достоверный результат в 86-98% случаев. Но со временем показатели точности снижаются до 15-20%. Особенно если ребенок начинает принимать антибиотики.

«Золотым стандартом» диагностики коклюша является реакция иммуноферментного анализа (ИФА). Она позволяет выявить в сыворотке крови различные классы иммуноглобулинов. Это дает возможность врачу точно поставить диагноз, определить стадию инфекционного процесса, узнать насколько силен иммунитет к коклюшу.

Каждый из анализов на коклюш имеет свои особенности, показания, принципы интерпретации результатов. Давайте разберем их все.

Читайте также: При коклюше в крови

Посев отделяемого носоглотки на микрофлору

Этот анализ проводят в катаральном периоде заболевания, то есть в первые дни появления кашля. Исследование назначают после контакта с больным коклюшем, особенно если у ребенка нет прививок или нет данных об их проведении.

Чувствительность теста колеблется в зависимости от качества и сроков исследования от 20 до 90%. При этом анализ выявляет и коклюш, и паракоклюш. В более поздний период заболевания и при приеме антибиотиков его результативность сильно снижается. Исследование проводится натощак, через 2-3 часа после питья или еды. Материал забирают в среднем на 5-7 день заболевания двукратно: два дня подряд или через день. Мазок берется с поверхности ротоглотки.

Биоматериал помещают в специальную емкость и направляют в лабораторию. Там проводится посев материала на питательную среду. Через несколько дней проводится микроскопическое исследование выросших колоний бактерий. Предварительный результат обычно можно получить на 3-5 день, окончательный — на 5-7 день.

Наличие Bordetella в организме говорит или о заболевании коклюшем (паракоклюшем), или о бессимптомном носительстве. Лечение необходимо в любом из этих случаев.

Клинический анализ крови

Исследование проводят при подозрении на инфекционное заболевание, при кашле, повышении температуры и практически при любых заболеваниях. Анализ может дать информацию о наличии воспаления в организме, но что послужило причиной, на его основании сказать нельзя.

Кровь забирают натощак и отвозят в лабораторию. Само исследование проводится или на специальном гемоанализаторе, или с помощью ручного подсчета клеток крови.

Результаты анализа крови при коклюше у детей нельзя анализировать без учета клинической картины и данных других методов исследования. При заражении коклюшной инфекцией значительно повышается количество лейкоцитов и лимфоцитов, при этом скорость оседания эритроцитов (СОЭ) остается в пределах нормы. При паракоклюше повышения лейкоцитов не наблюдается.

Выявление антител к антигенам клеток Bordetella pertussis

При проведении анализа на антитела к коклюшу выявляют три вида иммуноглобулинов — IgA, IgG и IgM.

ИФА назначают при подозрении на коклюш, часто на поздних стадиях болезни, когда бактериологическое исследование уже неэффективно. То есть начиная со 2-3 недели заболевания. Диагностическая чувствительность этого метода — 66,6%, специфичность — 100%.

Забор крови проводится натощак, не раньше чем через 4 часа после последнего приема пищи. После этого из крови выделяют сыворотку, которая и является материалом для исследования. Собранный материал отправляется в лабораторию, где проводится серологический анализ на коклюш методом ИФА.

Исследование может быть как качественным (положительный/отрицательный результат), так и количественным (например, «титр 1:160»). Антитела IgM появляются в острой стадии коклюша примерно со второй недели заболевания. На 2-3 неделе обнаруживается IgA. На третьей неделе начинают образовываться антитела IgG. Именно они ответственны за формирование стойкого иммунитета. Интерпретировать результаты можно только в соответствии с клинической картиной, учитывая эпидемиологические и другие данные.

ПЦР-тестирование

Исследование можно проводить в течение первых 4-х недель заболевания. Чувствительность этого теста превосходит бактериологическое исследование во много раз. Специфичность метода -100%.

Мазок берется из носа или из ротоглотки. Забор материала желательно проводить натощак или через 2-3 часа после питья и еды. Предварительно полоскать рот не нужно.

В лаборатории в забранном материале определяются специфические участки ДНК бактерии, которая вызывает коклюш. Положительный результат говорит о заболевании коклюшем или о бактерионосительстве.

Не стоит самостоятельно выбирать тип анализа на коклюш, необходимо проконсультироваться со специалистом. И помните, на результат исследования влияет качество подготовки и проведения: техника взятия материала, условия транспортировки, состояние питательных сред.

Стоимость анализов на коклюш в частных клиниках

В среднем определение каждого типа иммуноглобулинов обойдется в 700-850 рублей. Бактериологический анализ на коклюш будет стоить уже дороже — от 850 до 1400 рублей. Ценовая разница при ПЦР-тестировании составляет от 300 до 800 рублей.

При этом стоит учесть расходы на взятие анализа крови (100-150 рублей) или мазка (200-250 рублей). Дополнительно клинический анализ крови с определением СОЭ будет стоить примерно 400-460 рублей.

Коклюш и паракоклюш — острые инфекции, которые легко маскируются под легкие заболевания. Только с помощью современных методов лабораторного исследования можно установить верный диагноз. А грамотный врач поможет интерпретировать полученные результаты и назначит лечение.

Источник

Коклюш

Коклюш, паракоклюш, бронхисептикоз.

Коклюш — заболевание, продолжающееся минимум две недели, без явлений интоксикации и повышения температуры тела, протекающее с приступообразным кашлем, усиливающимся ночью и по утрам, сопровождающимся покраснением лица, шумными вдохами (репризами), заканчивающимся отхождением вязкой слизи или рвотой в конце приступа кашля.

Осложнения коклюша:

Специфические: эмфизема легких, эмфизема средостения и подкожной клетчатки, ателектазы, коклюшная пневмония, нарушения ритма дыхания (задержки дыхания — до 30 с; остановки — апноэ — более 30 с), нарушение мозгового кровообращения, кровотечения (из носа, заднеглоточного пространства, бронхов, наружного слухового прохода), кровоизлияния (в кожу и слизистые оболочки, склеру и сетчатку глаз, головной и спинной мозг), грыжи (пупочная, паховая), выпадение слизистой оболочки прямой кишки, разрывы барабанной перепонки и диафрагмы.

Неспецифические осложнения обусловлены наслоением вторичной бактериальной флоры (пневмония, бронхит, ангина, лимфаденит, отит и др.). Резидуальные явления: хронические бронхолегочные заболевания (хронический бронхит, бронхоэктатическая болезнь); задержка психомоторного развития, неврозы, судорожный синдром, различные речевые расстройства; энурез; редко — слепота, глухота, парезы, параличи.

Лабораторная диагностика

Лабораторные исследования проводят с диагностической целью и по эпидемическим показаниям:

1) с диагностической целью:

— детям, кашляющим в течение 7 дней и более, независимо от указаний на контакт с больным коклюшем;

— детям с подозрением на коклюш и коклюшеподобные заболевания по клиническим данным; — взрослым с подозрением на коклюш и коклюшеподобные заболевания, работающим в родильных домах, детских больницах, санаториях, детских образовательных учреждениях и школах, в т.ч. закрытого типа;

Читайте также: Коклюш мед помощь ком

2) по эпидемическим показаниям (лицам, бывшим в контакте с больным):

— детям, посещающим детские образовательные учреждения, находящимся в детских больницах, санаториях, в которых были выявлены больные коклюшем/паракоклюшем, а также всем детям до 14 лет, общавшимся с больным коклюшем/паракоклюшем в домашних условиях;

— взрослым, работающим в указанных выше детских учреждениях, при выявлении в них больных коклюшем/паракоклюшем, а также при общении с больным коклюшем/паракоклюшем в домашних условиях.

Диагноз «коклюш, вызванный B. pertussis» ставится при подтверждении клинического диагноза «коклюш» хотя бы одним из указанных методов:

— выделение культуры B. pertussis; — обнаружение специфического фрагмента генома B. pertussis методом ПЦР; — у привитых детей и взрослых: выраженная сероконверсия, т.е. увеличение или уменьшение в 4 и более раз уровня специфических IgG и/или IgA (ИФА) или уровня агглютинирующих антител (РА) при исследовании парных сывороток, взятых с интервалом не менее 2 недель;

— у взрослых: допустимо однократное обнаружение специфических IgM (ИФА); — у непривитых детей: однократное обнаружение специфических IgM, и/или IgA, и/или IgG (ИФА) или антител в титре 1/80 и более (РА).

Диагноз «коклюш, вызванный B. parapertussis» ставится в случае: — выделения культуры B. parapertussis; — или при обнаружении фрагмента генома B. parapertussis методом ПЦР;

— или при обнаружении антител к B. parapertussis методом РА в титре не менее 1/80.

Диагноз «бронхисептикоз» ставится при выделении культуры B. bronchiseptica или при обнаружении специфического фрагмента генома B. bronchiseptica методом ПЦР.

Обследование методом ПЦР нередко оказывается эффективнее бактериологического метода в более поздние сроки заболевания и на фоне лечения антибиотиками.

Материал для исследования:

1.мазки со слизистой нижнего носового хода и задней стенки ротоглотки

2. культуры микроорганизмов.

Взятие мазков со слизистой нижнего носового хода

Мазки берут сухим стерильным назофарингеальным велюр-тампоном на пластиковом аппликаторе. Если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание. Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину до носоглотки, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа.После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с тампоном) помещают до места слома в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков. Конец зонда отламывают с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают и маркируют.

Взятие мазков из ротоглотки

Мазки из ротоглотки берут сухими стерильными зондами с вискозными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки.

После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с вискозным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков. Конец зонда отламывают, придерживая крышкой пробирки с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают, маркируют.

Хранение

Допускается хранение клинического материала до проведения исследования в течение 3 суток при температуре от 2 до 8 °С или 1 неделю — при температуре не выше минус 16 °С.

Источник

Взятие мазка из зева и носа: на дифтерию, менингит, коронавируc

Взятие мазка из зева и носа проводится с целью бактериологического и вирусологического исследования для определения возбудителя заболевания. Мазок берут при подозрении на дифтерию, менингококковую инфекцию и новую коронавирусную инфекцию COVID-19 (SARS-CoV-2). Диагностика проводится разными методами: бактериологическими и ПРЦ (метод полимеразной цепной реакции). Для медицинской сестры важно правильно взять мазок, чтобы результат исследования был достоверным.

Взятие мазка из зева и носа

Взятие мазка из зева и носа: показания и противопоказания

Цели взятия мазков из зева и носа следующие:

выявление возбудителя заболевания
выявление бактерионосительства
определение чувствительности микрофлоры ротоглотки и носоглотки к антибиотикам

Показания для манипуляции:

ангина, в особенности — при наличии патологического выпота на миндалинах
паратонзиллит
паратонзилляный (заглоточный) абсцесс
инфекционный мононуклеоз
стенозирующий ларингит, ларинготрахеит
подозрение на носительство стрептококковой и стафилококковой инфекции
подозрение на дифтерию
контакт с больным дифтерией
подозрение на коклюш
контакт с больным коклюшем
подозрение на менингит
контакт с больным менингитом
подозрение на коронавирусную инфекцию
контакт с больным COVID-19

Противопоказания:

абсолютных — нет. Относительные:

невозможность открыть рот
травмы, ожоги лица
анатомический дефект костей черепа
геморрагический диатез в тяжелой форме

Оснащение для проведения манипуляции

Для взятия мазка из зева и носа необходимо подготовить:

средства индивидуальной защиты (СИЗ) для медицинского работника — одноразовый дополнительный халат, шапочка, маска или респиратор, защитные очки или щиток, двойные перчатки
бланк направления на исследование
штатив для пробирок
стерильные зонды-тампоны
пробирки с транспортной средой
стерильный шпатель
стеклограф или нестираемый маркер
емкости с дезинфицирующими растворами

Набор для взятия мазка

Перед выполнением процедуры следует подготовить набор для забора мазка. Тип микроорганизма и планируемый тест определяют тип зонда-тампона и субстрата.

Для забора материала для исследования методом ПЦР следует использовать только зонды-тампоны с синтетическим волокном, намотанным на пластиковый стержень (другие могут вызвать ингибирование ПЦР). Нельзя использовать зонды-тампоны из органическим материалов (напр. хлопка, дерева) или с альгината кальция, поскольку они могут ингибировать ПЦР.

Кроме того, при взятии мазка в направлении коклюша не следует использовать хлопковые тампоны или тампоны из искусственного шелка (района). Полиэстеровые, дакроновые или нейлоновые тампоны на пластиковом стержне, вероятно, являются универсальными. На стержне зонда-тампона имеется: заводская отметка глубины, на которую он должен быть вставлен, и сужение, на котором его следует сломать после опускания в пробирку.

В случае диагностики на наличие SARS-CoV-2 можно использовать:

коммерческие наборы — содержат гибкий флокированный пластиковый зонд и пробирку с вирусологической средой
наборы home made (для мазков из горла и носа), содержащие:

стерильные флокированные или стандартные пластиковые зонды-тампоны с тампонами из дакрона, вискозы или искусственного шелка
пробирки со стерильным забуференным 0,9 % раствором NaCl в объеме, позволяющем погрузить конец зонда-тампона (рис. 1).

Как брать мазок из зева на коклюш

Рисунок 1. A — оборудование, необходимое для приготовления набора home made: 1 — игла для набирания 0,9 % раствора NaCl, 2 — шприц, 3 -небольшая упаковка с 0,9 % раствором NaCl (следует использовать небольшие упаковки, чтобы избежать контаминации раствора при его многократном использовании), 4 — зонд-тампон, 5 — пробирка. Б — 0,9 % раствор NaCl должен быть набран в шприц в асептических условиях. В — примерно 1 мл раствора следует налить в пробирку, в которую после взятия мазка будет помещен зонд-тампон

Перед взятием мазка следует описать пробирку, в которую будет помещен зонд-тампон, и наклеить на нее код (если требуется; рис. 2).

Как брать мазок из зева на коклюш

Рисунок 2. Описание и приклеивание кода на пробирку. На пробирке должна быть указана следующая информация: имя и фамилия пациента, дата рождения, дата и время взятия мазка

Взятие мазка из зева и носа: алгоритм

При заборе материала важно! правильно держать зонд — между большим пальцем и остальными пальцами кисти, взяв его в руку, как писчее перо:

Взятие мазка из зева и носа: как держать зонд

Вымыть руки гигиеническим способом
Надеть средства индивидуальной защиты
Представиться пациенту
Идентифицировать личность пациента
Убедиться в наличии информированного согласия на проведение процедуры
Объяснить пациенту цель и ход процедуры
Заполнить бланк направления на исследование
Промаркировать пробирки
Предложить пациенту удобно сесть лицом к источнику света

Взятие мазка из зева

Материал из зева и ротоглотки на дифтерию, коклюш, коронавирус, менингит, стафилло- и стрептококки следует забирать натощак и до приема лекарств либо не ранее, чем через 2 часа после приема пищи. Методика следующая:

Попросить пациента слегка запрокинуть голову
Взять в левую руку пробирку со стерильным влажным зондом и стерильный шпатель
Попросить пациента открыть рот
Левой рукой надавить на корень языка, правой — извлечь из пробирки стерильный зонд
Не касаясь зубов, слизистой языка и щёк, вращательными движениями провести зондом по дужкам и миндалинам, при необходимости — задней стенке ротоглотки. При взятии мазка на коклюш, коронавирус, менингит, носительство стрептококковой и стафилококковой инфекций — обязательно с задней стенки ротоглотки! Если имеются налёты — провести по границе здоровой и пораженной ткани, слегка нажимая на них зондом
Извлечь зонд и сразу поместить его в пробирку, не касаясь её стенок

Взятие мазка из зева с задней стенки глотки

Взятие мазка из носа

Попросить пациента очистить носовые ходы и слегка запрокинуть голову
Взять в левую руку пробирку с сухим зондом, правой — извлечь сухой зонд из пробирки
Передний назальный мазок. Легким вращательным движением ввести зонд в левый носовой ход по наружной стенке носа на глубину 1-3 см до нижней носовой раковины. Не касаться кожи крыльев носа!
Назальный мазок с задней стенки глотки. Применяется при заборе материала на SARS-CoV-2 (возбудитель коронавирусной инфекции). Техника меняется. После введения зонда на 1-3 см зонд слегка опустить книзу, аккуратно ввести под нижнюю носовую раковину до задней стенки носоглотки (на 3-4 см у детей и 5-6 см у взрослых). Извлечь зонд также вращательными движениями.
Не касаясь краёв пробирки, поместить в нее зонд.

Взятие мазка из носа

Взятие мазков из зева и носа на SARS-CoV-2 осуществляется специальными зондами. После забора материала конец каждого зонда отламывают и помещают в микропробирку типа эппендорф. Важно! Оба зонда — с материалом как из ротоглотки, так и из носоглотки — помещают в одну пробирку с крышкой для большей концентрации вирусов.

Отправка материала в лабораторию

Пробирки помещают в термос или термоконтейнер с хладоэлементами. Температура хранения материала — от +2ºC до +8ºC, время хранения — до 24 часов.

Пробирка должна быть правильно упакована. Правила упаковки образцов должны соответствовать 2-му уровню биологической безопасности (BSL2), а контейнеры должны быть упакованы и описаны в соответствии с принципами для агентов, вызывающих заболевания у людей. Применяется принцип тройной упаковки (1 — основной контейнер, 2 — вторичная упаковка, 3 — внешняя упаковка).

Наружная поверхность основного контейнера должна рассматриваться как контаминированная, поэтому ее следует помещать во вторичную упаковку таким образом, чтобы минимизировать риск контаминации вторичной упаковки. В зависимости от процедур, используемых в данном учреждении, и количества людей, принимающих участие в заборе мазка и упаковке образцов, отдельные этапы процедуры могут отличаться. Например, если образцы берут в доме пациента и всю процедуру выполняет только один человек, то перед тем, как поместить основной контейнер во вторичную упаковку, он должен покинуть дом пациента, деконтаминировать руки, снять внешние перчатки и внешний халат, снова деконтаминировать руки, надеть новую пару перчаток, продезинфицировать их, поместить основной контейнер во вторичную упаковку, плотно закрыть ее, продезинфицировать руки, а затем внешнюю поверхность вторичной упаковки.

Вторичная упаковка должна содержать абсорбирующий слой, который будет абсорбировать жидкость при разгерметизации пробирки.

Направления, прикрепленные к образцам, не могут быть помещены во вторичную упаковку, но они должны быть помещены в запечатанный конверт, прикрепленный к внешней упаковке.

Надеемся, взятие мазка из зева и носа не вызовет у вас трудностей, а станет легко выполняемым навыком, которым должна владеть каждая медицинская сестра.