Igg igm iga коклюш

Анализ на коклюш — какой сдать?

Для диагностики коклюша в современное время доступно большое количество тестов и анализов, но как правильно выбрать необходимый и самый точный из них?

Итак, многие специалисты по всему миру рекомендуют:

Если кашель у подростков и взрослых длится менее двух недель, а у детей менее трёх недель то, целесообразно воспользоваться микробиологическими методами (посев) или методами амплификационной диагностики (полимеразно-цепная реакция, ПЦР) [1,2].

Если кашель у детей и взрослых длится более двух недель и в течение текущего года не проводилась вакцинация против коклюша то, целесообразно воспользоваться серологическими методами диагностики (например, иммуноферментным анализом, ИФА) [1,2].

Теперь немного подробнее о важных особенностях каждого метода.

1. Полимеразно-цепная реакция (ПЦР).

Необходимый материал для анализа — назофарингеальный мазок, но предпочтительнее использовать образец слизи из носоглотки [3]. Как правильно выполнить мазок представлено в нашем канале в телеграме (@pediatrics_rus).

ПЦР необходимо проводить в течение первых двух-трёх недель от начала кашля, так как спустя четыре недели от начала заболевания количество бактерий B.pertussis в носоглоточном секрете стремительно снижается, также количество бактерий снижается, если проводилась антибактериальная терапия (более 5 дней [4]).

У младенцев и ранее не привитых детей ПЦР допустимо выполнять в течение первых четырёх недель от начала кашля [4,5].

Для большей точности ПЦР всегда рекомендуется проводить параллельно с посевом [1], следовательно, при заборе материала следует брать два образца одномоментно — один для ПЦР, другой для посева. Зачем? ПЦР может давать ложноположительные результаты, так как определяет только наличие или отсутствие ДНК возбудителя, а не наличие живых форм [6].

При заборе ПЦР рекомендуется пользоваться палочками из нейлона, рэйона и полиэстера. При использовании хлопковой ваты возбудитель гибнет [7].

При подозреваемом коклюше важно проводить дифференциальную диагностику с аденовирусной, бокавирусной инфекциями, гриппом, парагриппом, M.pneumoniae, Chlamydia trachomatis, Chlamydia pneumoniae и прочими инфекциями [8].

ПЦР не рекомендуется проводить лицам, контактировавшим с больным коклюшем при отсутствии каких-либо симптомов [7].

2. Посев.

Посев на питательную среду — золотой стандарт диагностики коклюша [1-4].

Высокая вероятность получения наиболее точного результата отмечается у лиц, страдающих кашлем менее двух недель, если для лечения ещё не применялись антибактериальные препараты и, если вакцинация против коклюша проводилась более 12 месяцев назад [4].

Необходимый материал для проведения посева — отделяемое носоглотки.

Возбудитель коклюша — B.pertussis является очень чувствительным и привередливым микроорганизмом, поэтому рекомендуется, чтобы медперсонал строго следовал инструкции и соблюдал технику забора материала для анализа.

В среднем результат посева может быть готов через 4-10-14 дней [9,10], всё зависит от возможностей лаборатории. У ранее не болевших и не привитых против коклюша предварительный результат посева может быть готов уже через 72-96 часов [9,11].

Большим преимуществом посева является то, что можно определить чувствительность микроорганизма к антибиотикам и, следовательно, правильно подобрать препараты для последующего лечения. Кроме того, по данным посева, можно определить, какой конкретно штамм бактерии циркулирует на определённой территории и оценить эффективность применяемой вакцины [12].

3. Иммуноферментный анализ (ИФА).

В случае поздней диагностики, когда кашель длится более 3-4 недель и/или уже начата или проведена антибиотикотерапия, для лабораторного подтверждения коклюша можно воспользоваться серологическими методами диагностики, например, иммуноферментным анализом (ИФА).

При помощи ИФА можно определять антитела классов IgM, IgA и IgG к различным антигенам возбудителя: коклюшному токсину (PT), филаментозному гемагглютинину (FHA), пертактину (PRN). Наиболее специфичным антигеном является коклюшный токсин, так как это единственный антиген, который характерен только для B.рertussis [12]. Остальные антигены могут присутствовать и у других представителей Bordetella.

У 25% младенцев и 10% подростков антитела к коклюшному токсину (РТ) могут отсутствовать [2,3].

Серологическое исследование для диагностики коклюша можно использовать с 3 до 12 недель с момента начала кашля [13,14]. Материалом для исследования является кровь.

Лабораторная диагностика коклюша и рекомендуемые временные интервалы для выполнения различных анализов

Какой класс антител лучше определять?

1. Антитела класса IgM.

• Свидетельствуют об остром инфекционном процессе.
• Образуются не раньше второй недели от начала заболевания, следовательно, их определение раньше этого срока нецелесообразно [9,14].
• У некоторых детей и взрослых независимо от наличия вакцинации или перенесённого ранее заболевания антитела класса IgM могут вырабатываться в малом количестве и не определяться по данным анализа [9].
• Если определение IgM проводилось в первые две недели от начала заболевания и результат был отрицательным, то рекомендуется повторить анализ спустя 10-14 дней. Если отрицательный результат получен спустя 14 дней от начала заболевания, то смысла переделывать анализ нет, так как с течением времени количество IgM только уменьшается.

2. Антитела класса IgG.

• Обнаруживаются на третьей неделе от начала заболевания, достигают своего наибольшего значения на 6-8 неделе болезни, после чего их уровень постепенно снижается [9].

Определение специфических IgG является наиболее распространённым и стандартизированным методом при серологической диагностике коклюша [2,3]

• Для более точной диагностики при определении IgG рекомендуется использовать парные сыворотки, так как по данным одного анализа сложно сделать достоверный вывод, ведь неизвестно с чем связано присутствие IgG — с заболеванием или проведенной ранее вакцинацией.
• Рекомендуемый интервал между исследованиями составляет 10-14 дней. Результат считается положительным при нарастании титра в 2-4 и более раз [3,9,15].

Определение титра антител — оптимальный метод диагностики коклюша у ранее иммунизированных подростков и взрослых [1,9].

Определение IgG рекомендуется, если в течение текущего года (12 месяцев) не проводилась вакцинация против коклюша [1,9].

• При исследовании однократно взятой сыворотки (даже у ранее привитого более 12 месяцев назад взрослого или ребёнка) результат по обнаружению антител класса IgG может быть расценен как положительный только в случае высокого титра (точное значение необходимо уточнять в лаборатории, так как данные разнятся в зависимости от техники анализа и используемых реагентов) [14].

Во вкладке «Дополнительные материалы» ниже можно скачать памятку об особенностях лабораторной диагностики коклюша в формате pdf.

4. Клинический анализ крови.

В общем анализе крови при коклюше характерно увеличение количества лейкоцитов и лимфоцитов [1-4]. Количество лимфоцитов увеличивается под действием токсина коклюшной палочки [2], однако отсутствие повышения лейкоцитов не исключает коклюш. Клинический анализ крови является только дополнительным методом диагностики [5].

Имеются данные, что если по результатам клинического анализа крови у ребёнка определяется более 10 000 лейкоцитов в 1 мкл и более чем 50% из них составляют лимфоциты, то диагноз коклюша можно рассматривать как вероятный (конечно, при наличии характерной клинической картины) [16]. Если в повторном анализе — через 24 часа — отмечается повышение лейкоцитов более 20 000 в 1 мкл и из них более чем 50% лимфоцитов, то это свидетельствует о том, что вероятность коклюша крайне высока [16].

При оценке клинического (общего) анализа крови у маленьких детей также следует помнить, что если в течение беременности мама младенца прививалась от коклюша, то повышения лейкоцитов может и не быть [16].

5. Дополнительные обследования.

В связи с риском развития осложнений у детей первого года жизни в случае госпитализации рекомендуется выполнять рентгенографию органов грудной клетки (из-за риска пневмонии) и эхокардиограмму (из-за риска лёгочной гипертензии). Остальные исследования — по показаниям.

Подробнее о симптомах коклюша и его лечении можно прочитать в наших статьях по тегу #коклюш.

Источник

Bordetella pertussis, IgA

[07-150] Bordetella pertussis, IgA

1210 руб.

Исследование, направленное на выявление специфических антител класса IgА к возбудителю коклюша (Bordetella pertussis), для диагностики острой и текущей инфекции.

Синонимы русские

Антитела класса IgА к возбудителю коклюша; Антитела класса IgА к Bordetella pertussis; иммуноглобулины класса А к Bordetella pertussis; Антитела класса IgА к бактерии Борде — Жангу.

Синонимы английские

Bordetella pertussis Antibodies, IgА; Bordetella pertussis Specific IgА; Anti-Bordetella pertussis IgА.

Метод исследования

Иммуноанализ.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Коклюш представляет собой острую антропонозную бактериальную инфекцию, одним из характерных признаков которой является продолжительный приступообразный спастический кашель. Возбудителем является Bordetella pertussis, палочка Борде — Жангу, неподвижная мелкая грамотрицательная коккобацилла, относящаяся к строгим аэробам. Инфекция передается воздушно-капельным путем. Источником инфекции является больной человек с любой формой инфекционного процесса.

Микроорганизм B. pertussis имеет сложную антигенную структуру. Основными антигенными мишенями для специфичных антител являются коклюшный токсин, поверхностный белок — филаментозный гемагглютинин, белок наружной мембраны пертактин, липополисахарид, поверхностные белки — агглютининогены. В зависимости от присутствия в бактериальной клетке агглютиногенов 2-го и 3-го класса выделяют четыре серотипа B. рertussis. Кроме описанных, в антигенную структуру B. pertussis входят гемагглютинины, аденилатциклаза-гемолизин.

В течении заболевания выделяют следующие периоды: инкубационный (длительностью от 3 до 14 дней, в среднем 7-8 дней), катаральный (от 5-8 до 11-14 дней), пароксизмальный, или спазматический (от 2-3 до 6-8 недель и более), период обратного развития, или ранней реконвалесценции (от 2 до 8 недель), и реконвалесценции (от 2 до 6 месяцев). Наиболее характерными для коклюша являются проявления, характеризующие пароксизмальный период заболевания. К ним относятся сухой спастический кашель, имеющий приступообразное течение, цианоз носогубного треугольника, акроцианоз, возможна рвота, слабость, температура тела преимущественно нормальная. В клиническом анализе крови может отмечаться лейкоцитоз, относительный и абсолютный лимфоцитоз. При тяжелом течении заболевания возможно развитие осложнений: нарушение мозгового кровообращения, потеря сознания, судороги, эмфизема легких и средостения, ателектазы, кровотечения, грыжи, присоединение вторичной инфекции с развитием бронхита, пневмонии, плеврита, отита, медиастинита. Следует отметить, что наиболее тяжело заболевание протекает у детей раннего возраста. Оно характеризуется более коротким инкубационным, длительным пароксизмальным периодами, развитием тяжелых последствий и осложнений. У взрослых людей и лиц после предшествующей вакцинации коклюш может протекать в легкой, атипичной или стертой форме.

Диагностика коклюша основана на эпидемиологических, клинических данных и результатах изменений лабораторных показателей. В клинической лабораторной диагностике коклюша применяют несколько методов: бактериологический метод для выявления роста колоний возбудителя; серологический метод, направленный на определение антител к антигенам B. pertussis; метод полимеразной цепной реакции — для выявления генетического материала возбудителя коклюша. Диагноз ставится при подтверждении клинического диагноза «коклюш» хотя бы одним из указанных методов.

Серологическое обследование позволяет выявлять в сыворотке крови специфические антитела, направленные к антигенам возбудителей B. рertussis. Обнаружение данных антител возможно с помощью реакции непрямой гемагглютинации или методом иммуноферментного анализа (ИФА). Метод ИФА позволяет выявлять антитела классов IgA, IgM и IgG к антигенам B. рertussis, чаще всего к коклюшному токсину — филаментозному гемагглютинину. Серологическую диагностику коклюша целесообразно применять не раньше второй недели заболевания, оптимальными являются сроки с 3-й по 6-ю неделю заболевания.

При первичном инфицировании возбудителем B. рertussis на второй неделе от появления клинических симптомов заболевания начинают синтезироваться антитела классов IgA и IgM. Далее на 3-4-й неделе заболевания начинается синтез антител класса IgG, достигая максимального уровня к 6-8-й неделе и далее постепенно снижаясь. Обнаружение антител класса IgA может свидетельствовать об острой или текущей инфекции у детей и взрослых лиц, не прошедших вакцинацию. У вакцинированных детей и взрослых о наличии инфекции свидетельствует выраженная сероконверсия. При этом отмечается снижение или увеличение уровня специфических антител класса IgA и/или IgG в четыре и более раз, в парных сыворотках, взятых с интервалом не менее 2 недель. Следует отметить, что у детей младше шести месяцев может отсутствовать выработка антител класса IgA на инфекцию, вызванную B. рertussis, поэтому отрицательный результат теста на IgA у детей данного возраста не означает отсутствие коклюша.

Для чего используется исследование?

• Для серологической лабораторной диагностики коклюша, вызванного возбудителем Bordetella pertussis.
• Для диагностики острой и текущей инфекции, вызванной Bordetella pertussis, начиная со второй недели от появления первых клинических симптомов заболевания.
• Для диагностики острой и текущей инфекции у детей, не вакцинированных против коклюша.
• Для диагностики острой и текущей инфекции у вакцинированных детей и взрослых при признаках выраженной сероконверсии.

Когда назначается исследование?

• При клинических проявлениях коклюша: сухой спастический кашель, имеющий приступообразное течение, сопровождающийся глубоким свистящим вдохом, рвотой, цианоз носогубного треугольника, акроцианоз, слабость, насморк, слезотечение, температура тела преимущественно нормальная, возможна лихорадка, в клиническом анализе крови — лейкоцитоз.
• При подозрении на коклюш, вызванный Bordetella pertussis, начиная со второй недели от появления первых клинических симптомов заболевания.
• При обследовании лиц, находившихся в тесном контакте с больными коклюшем.
• При дифференциальной диагностике с острыми респираторными вирусными заболеваниями, корью, бронхитом, пневмонией, бронхиальной астмой.

Что означают результаты?

Референсные значения:

Результат: отрицательный.

Причины положительного результата:

• коклюш;
• острая и текущая инфекция, вызванная возбудителем Bordetella pertussis;
• легкие, стертые или атипичные формы коклюша при отсутствии типичных клинических проявлений.

Причины отрицательного результата:

• отсутствие коклюша;
• отсутствие или снижение иммунного ответа;
• ранние сроки инфицирования вирусом и отсутствие синтеза специфических антител;
• ложноотрицательные или неспецифические результаты.

Что может влиять на результат?

• Клинический период заболевания, возраст пациента, предшествующая вакцинация.
• Особенности иммунного ответа у новорождённых детей.



Важные замечания

• У детей младше шести месяцев, а также у лиц с иммунодефицитными состояниями может отсутствовать выработка антител класса IgA на инфекцию, вызванную B. рertussis. Поэтому отрицательный результат теста на IgA у детей данного возраста не означает отсутствие коклюша.
• При интерпретации результатов обследования необходимо учитывать возраст пациентов, клиническую стадию (период) заболевания, предшествующую вакцинацию.
• Для комплексной оценки полученных результатов их необходимо сопоставлять с эпидемиологическими, клиническими и другими лабораторными данными.

Также рекомендуется

• Bordetella pertussis, IgM
• Bordetella pertussis, IgG
• Anti-Bordetella pertussis, anti-Bordetella parapertussis
• Bordetella pertussis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Посев на Bordetella pertussis/parapertussis
• Лабораторная диагностика коклюша и паракоклюша
• Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)
• Лейкоцитарная формула

Кто назначает исследование?

Инфекционист, педиатр, пульмонолог, оториноларинголог, терапевт, врач общей практики.

Литература

• Ghanaie RM, Karimi A, Sadeghi H, Esteghamti A, Falah F, Armin S, Fahimzad A, Shamshiri A, Kahbazi M, Shiva F. Sensitivity and specificity of the World Health Organization pertussis clinical case definition / Int J Infect Dis. 2010 Dec;14(12):e1072-5.
• Piekarska K, Rzeczkowska M, Rastawicki W, Dąbrowska-Iwanicka A, Paradowska-Stankiewicz I.Usefulness of laboratory methods in diagnosis of pertussis in adult with paroxysmal cough / Przegl Epidemiol. 2014;68(4):633-6.
• Guiso N, Berbers G, Fry NK, He Q, Riffelmann M, Wirsing von König CH; EU Pertstrain group.What to do and what not to do in serological diagnosis of pertussis: ations from EU reference laboratories / Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2011 Mar;30(3):307-12.
• Laboratory manual for the diagnosis of whooping cough caused by Bordetella pertussis / Bordetella parapertussis. World Health Organization. Dept. of Immunization, Vaccines and Biologicals. WHO/IVB/04.14, 2004.
• Инфекции дыхательных путей. Диагностика коклюша и паракоклюша. — Методические рекомендации МР 3.1.2.0072-13.

Источник