Что такое рпга к коклюшу
Содержание статьи
РПГА коклюш
Доронин Иван Михайлович Заведующий отделом ПЦР и генетики,
Диагностика коклюша методом РПГА (anti-Bordetella pertussis)
Определение в крови иммунных антител к коклюшной палочке используют для диагностирования коклюша и оценивания напряженности иммунитета после вакцинации.
При лабораторном методе РПГА ( реакции пассивной гемагглютинации) серолог готовит в лунках лабораторных планшеток последовательное разведение исследуемых проб (1:10, 1:20) и добавляет к образцам коклюшный диагностикум (стандартные эритроциты, нагруженные антигеном возбудителя) и оставляют на 120 минут в термостате. Считывают результат по оцениванию внешнего вида осадка: при позитивном результате (наличии антител к патогену) эритроциты слипаются и образуют «перевернутый зонтик», при негативном — «пуговку».
Подготовка к исследованию:
- Анализ проводится утром, натощак
- С последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов
- Запрещены спиртные напитки (не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала)
- Не рекомендуется сдавать кровь на серологию после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур
Тип биоматериала: венозная кровь
Синонимы (rus): Специфические антитела к палочке коклюша
Синонимы (eng): Total antibodies to Bordetella pertussis
Методы исследования: полуколичественная реакция пассивной гемагглютинации
Сроки выполнения: 7-10 дней
Общие сведения о коклюше и его выявлении
Коклюшем называют острую бактериальную инфекцию, характеризующуюся приступами спазматического кашля. Это опасное воздушно-капельное заболевание вызывает антропонозная (способная поражать только человеческий организм) бактерия Bordetella pertussis или Борде-Жангу, названная в честь ученых, описавших ее впервые.
Наиболее часто инфекция поражает дошкольников, около 50% случаев — это дети двухлетнего возраста. Инфицирование происходит при контакте с больным человеком или вирус-носителем.
Инфекционный процесс коклюша характеризуют четыре стадии течения:
- продромальная;
- катаральная;
- пароксизмальная;
- реконвалесценции (выздоровления).
Чаще всего к специалисту пациенты обращаются в пароксизмальном периоде — при наличии характерных клинических проявлений инфекции: спастического кашля до рвоты и синюшных кожных покровов лица.
Ведущая роль в диагностировании коклюша принадлежит серологическим методам — выявлении иммунных антител. Одной из наиболее используемых методик является реакция пассивной гемагглютинации (РПГА), ее точность и информативность намного превосходит бактериологический метод.
Кому и когда специалист может назначить обследование?
Пульмонологи, инфекционисты, педиатры назначают серологический анализ для оценивания эффективности проведенной профилактической прививки АКДС (адсорбированной коклюшно-дифтерийно-столбнячной вакцины) и клинического разграничения острого течения коклюша с корью, гриппом, ОРВИ.
Расшифровка данных анализа
«Негативный результат» означает:
- инфицирования бактерией Bordetella pertussis нет;
- неэффективность АКДС-вакцины;
- угасание гуморального ответа после проведенной ранее вакцинации.
Диагностическим считается титр 1:100 — «положительный результат». Свидетельствует о пароксизмальной стадии коклюша и специфическом гуморальном ответе.
Рекомендации:
Проведение метода РПГА не следует использовать для диагностирования коклюша у детей до 1 года, пожилых людей и больных с иммунодепрессией (угнетением иммунитета).
Источник
Лабораторная диагностика коклюша и паракоклюша
Комплексное исследование, направленное на диагностику коклюша и паракоклюша, а также на оценку эффективности вакцинации против коклюша.
Синонимы русские
Возбудители коклюша, паракоклюша; комплексное обследование.
Синонимы английские
Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis; comprehensive examination.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь, мазок из носоглотки, мазок из зева (ротоглотки).
Как правильно подготовиться к исследованию?
- За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
Общая информация об исследовании
Коклюш представляет собой острую антропонозную бактериальную инфекцию. Возбудитель — Bordetella pertussis (палочка Борде — Жонгу), мелкая неподвижная грамотрицательная коккобацилла, строгий аэроб. Инфекция передается воздушно-капельным путём. Источником инфекции является больной человек с любой формой инфекционного процесса.
В течении заболевания выделяют следующие периоды: инкубационный период (длительностью от нескольких дней до двух недель), катаральный (от 5-8 до 11-14 дней), пароксизмальный, или спазматический (2-8 недель), разрешения (2-4 недели) и реконвалесценции (2-6 месяцев). Наиболее характерными для коклюша являются проявления, характеризующие пароксизмальный период заболевания. К ним относятся сухой спастический кашель, цианоз носогубного треугольника, акроцианоз, возможна рвота, лихорадка, слабость, в гемограмме — лейкоцитоз, лимфоцитоз. Следует отметить, что наиболее тяжело заболевание протекает у детей раннего возраста, возможно развитие осложнений со стороны бронхолегочной и нервной систем. У взрослых и лиц после вакцинации коклюш чаще протекает в легкой, атипичной форме, как правило, без осложнений.
Паракоклюш — это острая бактериальная инфекция респираторного тракта, поражающая детей и взрослых. Возбудителем инфекции является аэробная палочка Bordetella parapertussis. Клинические проявления данного заболевания схожи с картиной коклюша, характерна более стертая смена периодов, легкое течение, редкое развитие осложнений, преимущественно у детей.
Диагностика коклюша и паракоклюша основана на клинико-эпидемиологических данных, результатах изменений в клиническом анализе крови и подтверждается лабораторными методами. В клинической лабораторной диагностике данных заболеваний применяют несколько методов: бактериологический метод для выявления роста колоний возбудителей коклюша/паракоклюша; серологический метод, направленный на определение суммарных антител к данным возбудителям; метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) — для выявления генетического материала возбудителя коклюша.
Бактериологическое обследование является первым этапом диагностики, но позволяет выявлять возбудителей только на ранних сроках заболевания, в первые 2-3 недели.
Метод ПЦР является высокоэффективным в диагностике коклюша, позволяет выявлять фрагменты ДНК возбудителя B. pertussis в исследуемом биоматериале, обладает высокой диагностической специфичностью, достигающей 100 %. Использование данного метода рекомендовано в первые три недели от начала клинических проявлений заболевания, то есть в катаральный и ранний пароксизмальный период. В более поздние сроки заболевания диагностическая чувствительность метода падает. Следует отметить, что в отличие от других лабораторных методов ПЦР эффективна на фоне лечения антибактериальными препаратами. Также она используется при обследовании детей раннего возраста, в отличие от более старших детей и взрослых, когда возможно возрастание числа ложноположительных результатов. У лиц, вакцинированных против коклюша, положительный результат данного метода может свидетельствовать о транзиторном носительстве патогена, а не об активной форме заболевания.
Серологическое обследование позволяет выявлять в сыворотке крови специфические антитела, направленные к антигенам возбудителей B. pertussis и B. parapertussis. Они могут быть обнаружены с помощью реакции непрямой гемагглютинации (РНГА).
При выборе РНГА в качестве диагностического теста при подозрении на коклюш и паракоклюш следует учитывать клинический период заболевания, возраст пациента и наличие предшествующей вакцинации. Для подтверждения диагноза необходимо определение нарастания титра антител в четыре и более раза в парных сыворотках, взятых с интервалом 10-14 дней. Реакцию ставят параллельно с коклюшным и паракоклюшным антигеном. Серологическое обследование рекомендовано применять в период 3-6 недель от начала первых клинических симптомов заболевания, характеризующий пароксизмальный период коклюша. Данный метод не рекомендуется применять детям до 3 месяцев, так как иммунная система новорождённых в это время ещё незрелая и могут быть обнаружены материнские антитела в низких титрах. Также не рекомендуется проводить серологическое исследование лицам в течение 1 года после вакцинации против коклюша вследствие невозможности различить иммунный ответ на вакцинацию или на первичную инфекцию. Титр антител к B. pertussis может быть определен для оценки эффективности прививки против коклюша у детей.
Для чего используется исследование?
- Для комплексной лабораторной диагностики коклюша и паракоклюша.
- Для диагностики коклюша в первые три недели от начала заболевания, характеризующие катаральный и ранний пароксизмальный период, а также на фоне лечения антибактериальными препаратами.
- Для диагностики коклюша и паракоклюша в спазматический (пароксизмальный) период заболевания.
- Для оценки эффективности вакцинации против коклюша.
Когда назначается исследование?
- При клинических проявлениях коклюша/паракоклюша: сухой спастический кашель, сопровождающийся глубоким свистящим вдохом, рвотой, цианозом носогубного треугольника, акроцианоз, лихорадка, слабость, насморк, слезотечение.
- При обследовании лиц, находившихся в тесном контакте с больными коклюшем/паракоклюшем.
- При оценке эффективности вакцинации против коклюша.
Что означают результаты?
Референсные значения
1. anti-Bordetella pertussis
Результат: отрицательный.
Титр: 1:80 — условно-защитный титр у невакцинированных лиц; 1:160 — условно-защитный титр поствакцинального иммунитета.
2. anti-Bordetella parapertussis
Результат: отрицательный.
Титр:
3. Bordetella pertussis, ДНК
Результат: не обнаружено.
Причины положительного результата:
- коклюш;
- паракоклюш;
- транзиторное носительство;
- иммунный ответ после вакцинации.
Причины отрицательного результата:
- отсутствие коклюша/паракоклюша;
- неэффективная вакцинация против коклюша;
- снижение иммунологического ответа после вакцинации;
- ложноотрицательные результаты.
Что может влиять на результат?
- Клинический период заболевания, возраст пациента, наличие предшествующей вакцинации;
- применение антибактериальных препаратов в зависимости от стадии (периода) заболевания и применяемого метода лабораторной диагностики;
- особенности иммунного ответа у новорождённых детей;
- предшествующая вакцинация.
Важные замечания
- При интерпретации результатов обследования необходимо учитывать методы диагностики, возраст пациентов, клиническую стадию (период) заболевания, предшествующую вакцинацию.
- Для комплексной оценки полученных результатов их необходимо сопоставлять с эпидемиологическими, клиническими и другими лабораторными данными.
Также рекомендуется
- Посев на Bordetella pertussis/parapertussis
- Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)
Кто назначает исследование?
Инфекционист, педиатр, пульмонолог, оториноларинголог, терапевт, врач общей практики.
Литература
- Ghanaie RM, Karimi A, Sadeghi H, Esteghamti A, Falah F, Armin S, Fahimzad A, Shamshiri A, Kahbazi M, Shiva F. Sensitivity and specificity of the World Health Organization pertussis clinical case definition / Int J Infect Dis. 2010 Dec;14(12):e1072-5.
- Przegl Epidemiol. 2014;68(4):633-6.
- Piekarska K, Rzeczkowska M, Rastawicki W, Dąbrowska-Iwanicka A, Paradowska-Stankiewicz I.Usefulness of laboratory methods in diagnosis of pertussis in adult with paroxysmal cough / Przegl Epidemiol. 2014;68(4):633-6.
- Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
- Laboratory manual for the diagnosis of whooping cough caused by Bordetella pertussis / Bordetella parapertussis. World Health Organization. Dept. of Immunization, Vaccines and Biologicals. WHO/IVB/04.14, 2004.
- Инфекции дыхательных путей. Диагностика коклюша и паракоклюша. — Методические рекомендации МР 3.1.2.0072-13.
Источник
anti-Bordetella pertussis, anti-Bordetella parapertussis
[07-086] anti-Bordetella pertussis, anti-Bordetella parapertussis
720 руб.
Определение в крови антител к возбудителю коклюша и паракоклюша (Bordetella pertussis и Bordetella parapertussis), используемое для диагностики этих заболеваний, а также для оценки эффективности вакцинации АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная прививка).
Синонимы русские
Антитела к палочке коклюша и паракоклюша, бактериям Борде — Жангу, иммуноглобулины к возбудителю коклюша и паракоклюша.
Синонимы английские
Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis Antibodies, Abs.
Метод исследования
Реакция агглютинации.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Bordetella pertussis — это грамотрицательная аэробная коккобацилла, являющаяся возбудителем коклюша. Ближайший родственник этого микроорганизма, бактерия Bordetella parapertussis, также способна вызывать схожее по клинической картине, но более мягкое по течению заболевание респираторного тракта, называемое паракоклюшем. Риску заболевания коклюшем и паракоклюшем подвержены все возрастные группы, и прививка АКДС не обеспечивает 100-процентную защиту от инфекции Bordetella.
Антитела к возбудителям коклюша и паракоклюша могут быть обнаружены через 1-2 недели после возникновения первых симптомов заболевания (эти сроки могут быть увеличены у новорождённых детей). Основными антигенами, взаимодействующими с anti-Bordetella pertussis и anti-Bordetella parapertussis, являются филаментозный гемагглютинин, коклюшный токсин, белок пертактин, липоолигосахарид и фимбриальные антигены. В ответ на инфекцию вырабатываются все классы иммуноглобулинов. Титр защитных антител постепенно снижается в течение первых 1-3 лет после заболевания или вакцинации.
Существует несколько лабораторных методов диагностики Bordetella-ассоциированной инфекции. Обнаружение специфических антител к Bordetella составляет основу серологических методов диагностики. Одним из используемых методов является реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). При выборе РНГА в качестве диагностического теста при подозрении на коклюш и паракоклюш следует учитывать клиническую стадию заболевания, возраст пациента и наличие вакцинации в прошлом.
В течении коклюша можно выделить 4 стадии: инкубационный период, катаральную, пароксизмальную стадию и стадию выздоровления. Чаще всего пациент обращается за медицинской помощью при явных клинических признаках заболевания (спастическом кашле, рвоте, цианозе), характерных для пароксизмальной стадии. Серологическим методам принадлежит ведущая роль в выявлении коклюша в пароксизмальной стадии. Точность диагностики коклюша с помощью серологии в этой стадии значительно превосходит точность бактериологического метода.
РНГА — реакция непрямой гемагглютинации — это непрямой метод диагностики, результаты которого зависят от особенностей иммунной системы пациента. Она может быть с успехом применена при подозрении на коклюш и паракоклюш у детей и взрослых. РНГА не используется для диагностики коклюша у младенцев — это связано с некоторыми сложностями при интерпретации результатов, возникающими в результате незрелости иммунной системы новорождённых и влияния материнских антител. Также с особой осторожностью следует трактовать результаты РНГА у пожилых пациентов, а также пациентов с иммуносупрессией (ВИЧ-инфекция, прием глюкокортикостероидов).
Следует отметить, что РНГА не может быть использована в качестве диагностического теста в течение года после прививки АКДС, так как не позволяет различить иммунологический ответ, вызванный текущей инфекцией и вакцинацией.
Для доказательства текущей инфекции сравнивают титр антител в парных сыворотках, полученных с промежутком примерно в 1 месяц. В отличие от большинства других методов диагностики, чувствительность РНГА не зависит от назначения антибактериальных препаратов. Диагностически значимым является 50-100-процентное нарастание титра антител в парных сыворотках. Постепенное нарастание концентрации антител наблюдается при инфекции ранее не вакцинированных пациентов, и наоборот, при повторном заражении пациентов, получивших в течение предшествующих 3 лет вакцину АКДС, титр антител нарастает не постепенно, а стремительно. Отсутствие нарастания титра в парных сыворотках также менее характерно для взрослых пациентов. В такой ситуации обнаружение высокого титра антител при однократном исследовании сыворотки в сочетании с клиническими признаками коклюша может оказаться достаточным критерием для постановки диагноза.
РНГА является дополнительным методом диагностики коклюша и паракоклюша. Для получения максимально полной диагностической информации рекомендуется провести некоторые дополнительные лабораторные тесты (ПЦР, посев на среду).
Эффективность стандартного протокола вакцинации ребенка с помощью вакцины АКДС составляет 80-85 %. Титр антител к Bordetella pertussis может быть определен для оценки эффективности прививки АКДС у детей.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики коклюша и паракоклюша у детей и взрослых, особенно в пароксизмальную стадию заболевания.
- Для оценки эффективности вакцинации АКДС.
Когда назначается исследование?
- При симптомах коклюша (пароксизмальная фаза): интенсивном кашле, сопровождающемся глубоким свистящим вдохом, рвоте, синюшней коже на лице.
- При оценке эффективности вакцинации АКДС.
Что означают результаты?
Референсные значения
Компонент | Референсные значения |
Результат anti-Bordetella pertussis | отрицательный |
Титр: anti-Bordetella pertussis | 1:80 — условно-защитный титр у невакцинированных лиц; 1:160 — условно-защитный титр поствакцинального иммунитета |
Результат anti-Bordetella parapertussis | отрицательный |
Титр: anti-Bordetella parapertussis |
Положительный результат:
- коклюш или паракоклюш;
- иммунный ответ после вакцинации АКДС.
Отрицательный результат:
- отсутствие инфекции Bordetella pertussis и Bordetella parapertussis;
- неэффективная вакцинация АКДС;
- угасание иммунологического ответа после вакцинации АКДС.
Что может влиять на результат?
- Особенности иммунного ответа: РНГА не используется для диагностики коклюша или паракоклюша у младенцев, результаты исследования у пожилых пациентов и пациентов с иммуносупрессией следует интерпретировать с особой осторожностью.
- Вакцинация АКДС в предшествующие 1-3 года: результат РНГА будет положительным даже при отсутствии текущей инфекции.
Важные замечания
- При интерпретации результатов анализа необходимо учитывать клиническую стадию заболевания, возраст пациента и наличие вакцинации в прошлом.
- Исследование имеет наибольшее значение при диагностике коклюша и паракоклюша в пароксизмальной стадии заболевания.
Также рекомендуется
- Bordetella pertussis, ДНК [ПЦР]
- Посев на Bordetella pertussis/parapertussis
- Лейкоцитарная формула
Кто назначает исследование?
Инфекционист, педиатр, пульмонолог, врач общей практики.
Литература
- Laboratory manual for the diagnosis of whooping cough caused by Bordetella pertussis / Bordetella parapertussis. World Health Organization. Dept. of Immunization, Vaccines and Biologicals. WHO/IVB/04.14, 2004.
- Müller FM, Hoppe JE, Wirsing von König CH. Laboratory diagnosis of pertussis: e of the art in 1997. J Clin Microbiol. 1997 Oct;35(10):2435-43.
- Fauci et al. Harrison’s Principles of Internal Medicine/A. Fauci, D. Kasper, D. Longo, E. Braunwald, S. Hauser, J. L. Jameson, J. Loscalzo; 17 ed. — The McGraw-Hill Companies, 2008.
Источник